Обнаружение фосфора методом ТСХ

123456

На стартовую линию хроматографической пластинки (см. табл. 1) наносят исследуемое хлороформное извлечение и растворы метчиков в хлороформе: дихлофоса, хлорофоса, карбофоса, метафоса. Пластинку хроматографируют в системе растворителей н-гексан:ацетон (2 : 1). Фронт пробега растворителя 10 см. Для обнаружения веществ на хроматограмме пластинку выдерживают 2—3 мин в камере (эксикаторе), насыщенной парами брома, затем переносят в вытяжной шкаф для удаления избытка брома. Опрыскивают 7 % раствором персульфата аммония, выдерживают 10 мин в сушильном шкафу при 100 °С, охлаждают до комнатной температуры. Затем пластинку последовательно обрабатывают 1 % раствором хлорида железа (III) в 80 % этаноле и 1 % раствором сульфосалициловой кислоты в 80 % этаноле. В области локализации ФОС наблюдаются белые и желтоватые пятна на розовом фоне пластинки.

Групповое разделение и предварительное обнаружение ФОС (ТСХ-скрининг ФОС)

Хроматографическую пластинку делят на три зоны в вертикальном направлении. На стартовую линию в каждой зоне в виде отдельных точек наносят исследуемое хлороформное извлечение и растворы метчиков в хлороформе: в зоне I — хлорофоса и дихлофоса, в зоне II — метафоса, в зоне III — карбофоса. Пластинку хроматографируют в системе бензол или хлороформ. Пробег фронта растворителя 10—15 см. Для обнаружения веществ на хроматограмме каждую зону обрабатывают соответствующим реактивом. При этом две другие зоны пластинки закрывают. Первую зону пластинки (метчики — хлорофос и дихлофос) обрабатывают 1% раствором резорцина в 5 % растворе натрия гидроксида. Дихлофос проявляется через 1—2 мин в виде пятна красно-розового цвета. После проявления дихлофоса пластинку нагревают 5 мин в сушильном шкафу при 100 °С. В зоне локализации хлорофоса появляется пятно красно-розового цвета. Вторую зону пластинки (метчик —метафос) обрабатывают 5 % спиртовым раствором натрия гидроксида и нагревают 5—10 мин в сушильном шкафу при 100—110 °С. Наблюдается лимонно-желтое окрашивание. Третью зону пластинки (метчик — карбофос) обрабатывают 0,5 % раствором палладия хлорида в 1 % растворе кислоты хлористоводородной. Карбофос образует желтое пятно.

Значения Rf хлорофоса, дихлофоса, метафоса и карбофоса на различных сорбентах указаны в табл. 1.

При обнаружении на хроматографической пластинке соответствующей группы ФОС (производные алкилфосфорной, тиофосфорной и дитиофосфорной кислот) с хлороформными извлечениями проводят химические реакции и ТСХ в частных системах растворителей.

ИЗОЛИРОВАНИЕ, ОБНАРУЖЕНИЕ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ ХЛОРОФОСА И ЕГО ПРОДУКТОВ РАСПАДА (ДИХЛОРОФОСА И ДИХЛОРАЦЕТАЛЬДЕГИДА)



ХЛОРОФОС

Другие наименования: Байер 13/59, Байер 15922, дивон, дилокс, дилон, дшгтерекс, негувон, солдед, трихлорфон, тугон, фосхлор, флибол Е, формитокс.

Хлорофос — белый кристаллический порошок (темп, плавл. 84 °С). Растворяется в воде, бензоле,хлороформе и других органических растворителях. Хуже растворяется в парафиновых углеводородах. Хлорофос медленно разлагается в кислой среде и быстрее — в щелочнойсреде. Относительно быстро разлагается препарат в разбавленных растворах и насвету. При разложении хлорофоса вкислой среде образуется метиловый спирт и О-метил-(2,2,2-трихлор-1-оксиэтил) фосфорная кислота:

При разложении хлорофоса в щелочной среде выделяется более токсичное соединение – О,О-диметил-О-(2,2-дихлорвинил)-фосфат (ДДВФ, дихлорофос).

Частично метаболиты выделяются в виде глюкуридов. Быстро всасываются из желудочно-кишечном тракте, через 5 мин обнаруживаются в крови, через 12 часов основном обнаруживаются продукты распада. В неизменном виде могут быть в сельскохозяйственных продуктах.

Продукты разложения хлорофоса в растворах подвергаются дальнейшим превращениям. Разрушение хлорофоса усиливается в присутствии окислителей, а также железа. Поэтому препарат нельзя хранить в железной таре.

Технический хлорофос — это кристаллическая или пастообразная масса, содержащая около 80% действующего вещества. При хранении кристаллизуется. Хлорофос выпускается в виде 80%-ного смачивающегося порошка или 7%-ного гранулированного препарата. Применяется как контактный и кишечный инсектицид для обработки садом виноградников, зерновых, бахчевых и других культур. 0,1 – 0,3% раствор хлорофоса, применяется для борьбы с мухами паразитами человека и животных, для обработки жилых помещений и т. д.

Хлорофос относится к ядохимикатам средней токсичности. Проявляет раздражающее действие на кожу, понижает активность ацетилхолинэстеразы в крови. Более выраженный холинэстеразный эффект имеет продукт разложения хлорофоса — дихлорофос. При хронических отравлениях хлорофосом наблюдается нарушение функции печени, заболевание сердечно-сосудистой системы и др.

Предельно допустимая концентрация хлорофоса в воздухе рабочей зоны 0,5 мг/м3, максимальная концентрация препарата в воздухе населенных мест 0,04 мг/м3.

Дихлорофос представляет собой бесцветную жидкость [темп. кип. 120 °С при 18,5 102 Па (14 мм рт. ст.)]. Мало растворяется в воде (1 : 100), хорошо растворяется в большинстве органических растворителей. В присутствии щелочей ДДВФ легко гидролизуется до диметилфосфорной кислоты и дихлорацетальдегида:

Эти же продукты гидролиза дихлорофоса образуются при разложении препарата в растениях, почве и т. д. При гидролизе дихлорофоса могут выделяться и другие соединения:

Дихлорофос выпускается в виде 50%-ного концентрата эмульсии, а также в баллончиках в виде аэрозоля. Применяется как инсектицид и акарицид контактного и фумигантного действия для борьбы с малярийными комарами, для дезинсекции складских помещений, для уничтожения эктопаразитовживотных, для борьбы с гнусом, клопами, тараканами и т. д.

Дихлорофос обладает высокой токсичностью. Вызывает отравление при попадании в организм людей и животных через дыхательные пути и кожу. Предельно допустимая концентрация ДДВФ в воздухе рабочей зоны 0,2 мг/м3. Остаточные количества этого препарата в пищевых продуктах не опускаются.

Изолирование хлорофоса и дихлорофоса из биологического материала:

1) 50 г измельченного биологического материала подкисляют 25% раствором кислоты хлористоводородной или серной (рН 2—3), заливают 50 мл эфира и настаивают 30-60 мин. при комнатной температуре при периодическом перемешивании содержимого колбы. Эфирное извлечение отделяют фильтрованием, а объект еще раз обрабатывают 50 мл эфира. Эфирные извлечения объединяют, помещают в фарфоровую чашку, добавляют 20 мл воды, подкисленной кислотой хлористоводородной или серной до рН 2—3, и оставляют до полного испарения эфира при комнатной температуре.

Оставшуюся водную жидкость фильтруют в делительную воронку, а чашку 2—3 раза промывают небольшими порциями подкисленной воды (по 2—3 мл), присоединяют промывные воды к основному фильтрату. Объединенное водное извлечение 3 раза экстрагируют 15 мл хлороформа. Объединенные хлороформные извлечения помещают в мерную колбу, доводят объем до 50 мл и подвергают исследованию.

2) В пробирку с притертой пробкой вносят 0,2-2 мл цельной крови, 10 мл эфира диэтилового, смесь взбалтывают 15 мин и оставляют на 10 мин. После разделения фаз сливают эфирную вытяжку, а оставшеюся в пробирке кровь еще два раза обрабатывают эфиром (порциями по 10 мл). Эфирные вытяжки переносят в фарфоровую чашку. Прибавляют к ним 10 мл воды и смесь оставляют до полного испарения эфира. Далее поступают как описано выше.

ОБНАРУЖЕНИЕ ХЛОРОФОСА И ДИХЛОРОФОСА:

1. Реакции отщепления органически связанного хлора, с резорцином в щелочной среде, образования изонитрила (на хлор в молекуле) проводятся аналогично реакциям на хлороформ и т.п. (см.Т.Х.чII).

2. Реакция Фудживара: впробирку вносят 1 мл исследуемого раствора и 1 мл пиридина 1 мл50% раствора натра едкого. Смесь нагревают на кипящей водной бане 5 мин. При наличии хлорофоса и дихлорофома появляется красное или розовое окрашивание.

3. Реакция со щелочью и ацетоном (на дихлорацетальдегид). Часть хлороформного извлечения (1—2 мл) испаряют в фарфоровой чашке без нагревания. Остаток растворяют в 0,5—1 мл этанола, затем прибавляют 1 мл ацетона и 0,5 мл 0,5 М спиртового раствора едкого натра. Через 10—15 минут появляется розовое окрашивание, переходящее в малиновое, затем в оранжевое.

3. Реакция окрашивания с 2,4-динитрофенилгидразином (на дихлорацетальдегид). В пробирку вносят 5-10 капли исследуемого раствора туда же прибавляют 1 мл 1,2 М раствора едкого натра, перемешивают и оставляют на 10 минут, затем прибавляют 0,5 мл 2,4-динитрофенилгидразина в 4 М кислоте хлористоводородной и нагревают в течение часа на водяной бане при температуре 400С .

После охлаждения к жидкости прибавляют 0,6 мл 4 М раствора едкого натра и этанол до объема 10 мл и жидкость перемешивают.

При наличии хлорофоса, дихлорофоса и дихлорацетальдегида образуется синее или сине-фиолетовое окрашивание.

5.Реакция окрашивания с о-толидином (на молекулу фосфорной кислоты). 5 мл хлороформной вытяжки выпаривают при комнатной температуре в небольшой фарфоровой чашке. Сразу же после испарения хлороформа остаток растворяют в 1 мл этанола и добавляют 1 мл 0,5 % раствора о-толидина в ацетоне и по 0,5 мл 0,5% раствора едкого натра и 3% раствора перекиси водорода. Наличие хлорофоса и дихлорофоса вызывает появление оранжевого окрашивания.

6.Тонкослойнохроматографическое исследование: исследование проводят последовательно в системах бензол, а затем н-гексан : ацетон. Проявление: обрабатывают 1 % раствором резорцина в 5 % растворе натрия гидроксида. Через 1—2 мин проявляется ДДВФ в виде пятна красно-розового цвета (оранжевого), пластинку сначала высушивают на воздухе, затем вносят в сушильный шкаф и нагревают до 100 0С, 10 мин. В присутствии хлорофоса на пластинке появляется оранжевое пятно с Rf=0,31, в присутствии дихлорофоса с Rf=0,56.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ:

Результат реакции 3 подвергают исследованию в электрофотоколориметре. Измерение оптической плотности производят при 530 нм (зеленый светофильтр) в кюветах со светопоглощающим слоем 20 мм. Раствором сравнения служит смесь реактивов.

Количественное определение хлорофоса. В фарфоровую чашку вносят одну десятую часть хлороформного извлечения и выпаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 2 мл воды очищенной, и раствор переносят в градуированную пробирку. Фарфоровую чашку дважды промывают водой по 1 мл и промывную жидкость присоединяют к основному раствору. Объем жидкости в пробирке доводят до 5 мл, затем прибавляют 1 мл 1,2 М раствора натрия гидроксида и через 10 мин в пробирку вносят 0,6 мл 0,1 % раствора 2,4-динитрофенилгидразина в 4 М растворе хлористоводородной кислоты. Пробирку нагревают на водяной бане 1 час при 40 °С, затем охлаждают и прибавляют 0,6 мл 4 М раствора натрия гидроксида и спирта этилового до 10 мл, раствор перемешивают и измеряют оптическую плотность с помощью фотоэлектроколориметра (светофильтр — зеленый, кювета с толщиной поглощающего слоя 20 мм).

В качестве раствора сравнения используют смесь реактивов: 1 мл 1,2 М раствора натрия гидроксида, 0,6 мл 0,1 % раствора 2,4-динитро­фенилгидразина в 4 М растворе кислоты хлористоводородной, 0,6 мл 4 М раствора натрия гидроксида, 2,8 мл спирта этилового и 5 мл воды.

Содержание хлорофоса находят по калибровочному графику, построенному с использованием стандартных образцов. Для построения графика в градуированные пробирки вносят 0,1, 0,3, 0,5, 0,7, 1,0, 2,0, 4,0, 5,0 мл стандартного раствора (100 мкг/мл). В первые семь пробирок приливают воду до 5 мл и во все пробирки прибавляют по 1 мл 1,2 М раствора натрия гидроксида. Через 10 мин в пробирки вносят по 0,6 мл 0,1 % раствора 2,4-динитрофенилгидразина в 4 М растворе кислоты хлористоводородной, пробирки нагревают 1 час на водяной бане при 40 °С. Жидкость охлаждают и к ней прибавляют 0,6 мл 4 М раствора натрия гидроксида и спирта этилового до 10 мл. Раствор перемешивают и измеряют оптическую плотность. По результатам измерения оптической плотности растворов строят калибровочный график.

Расчет содержания хлорофоса в объекте производят по формуле:

где Х — количество хлорофоса в 100 г объекта в мг;

С — количество хлорофоса в колориметрируемой пробе по калибровочному графику в мкг;

n — навеска объекта в г;

V1 — общий объем хлороформного извлечения в мл;

V2 — объем извлечения, взятый для определения в мл.

МЕТАФОС

О,О-Диметил-О-(4-нитрофенил)тиофосфат

Другие наименования: вофатокс, вофатокс ОМ, дальф, диметил-паратион, метацид, метилпаратион, метилфолидол и др.

Метафос — белое кристаллическое вещество (темп, плавл. 35—36 °С). Мало растворяется в воде (при 25 °Св 1 л воды растворяется 55 мг препарата) и в парафиновых углеводородах, хорошо растворяется в большинстве других органических растворителей.

При гидролизе метафоса в воде образуется п-нитрофенол и диметилтиофосфорная кислота. В щелочной среде скорость гидролиза метафоса увеличивается. В растениях он гидролизуется быстрее, чем непосредственно в воде. При нагревании до 140—160 °Сметафос почти полностью превращается в тиоловый изомер:

Эта реакция может происходить со взрывом.

Технический метафос представляет собой желтую или коричневую жидкость с неприятным запахом. Он содержит примеси п-нитрофенола, триметилтиофосфата и др. Метафос выпускается в виде 2,5%-ного дуста (вофатокс), 20%-ного концентрата эмульсии и 30%-ного смачивающегося порошка.

Метафос применяется как контактный инсектицид и акарицид для обработки плодовых деревьев, виноградников, зерновых, овощных и технических культур, а также как афицид.

Метафос относится к сильнодействующим ядовитым веществам. Обладает резко выраженной кожно-резорбтивной токсичностью, местного действия не оказывает. При пероральном введении метафос быстро проникает в кровь. При отравлении метафосом уменьшается содержание гемоглобина, увеличивается содержание метгемоглобина в крови и т. д. Угнетает активность ацетилхолинэстеразы. Слабо выражены кумулятивные свойства.

Предельно допустимая концентрация метафоса в воздухе рабочей зоны — 0,1 мг/м3. Содержание метафоса в пищевых продуктах не допускается.

Изолирование и очистка метафоса. В склянку вносят 150— 200 г мелкоизмельченного исследуемого материала и приливают диэтиловый эфир в таком количестве, чтобы он полностью покрыл твердые частицы объекта. Содержимое склянки оставляют на 1 ч, периодически взбалтывая. Затем отделяют эфирную вытяжку и выпаривают ее до 70 мл. Выпаренную эфирную вытяжку переносят в делительную воронку и прибавляют 25 мл 0,5%-ного раствора едкого натра. Жидкость взбалтывают 3—4 мин и отделяют водную фазу от эфирной. Взбалтывание эфирной вытяжки с новыми порциями едкого натра повторяют до тех пор, пока последняя порция этого раствора не перестанет окрашиваться в желтый цвет.

В делительную воронку вносят 7—10 г сульфата натрия, смесь несколько раз взбалтывают и оставляют на 10 мин. Эфирную вытяжку сливают с осадка сульфата натрия, переносят ее в колбу емкостью 200 мл и на водяной бане отгоняют эфир досуха

ОБНАРУЖЕНИЕ

1.Реакция с перборатом натрия и о-дианизидином. К 1 мл раствора исследуемого вещества в ацетоне прибавляют 0,5 мл раствора о-дианизидина и 2 мл раствора пербората натрия. В зависимости от содержания исследуемого вещества раствор окрашивается в желтый или красноватый цвет. Окраска развивается через 5—30 мин после введения реактивов в исследуемый раствор. Если смесь реагирующих веществ довести до рН = 10—11, то чувствительность реакции повышается в 3—4 раза.

Кроме метафоса эту реакцию дают меркаптофос, тиофос, фосфамид, хлорофос и некоторые другие органические соеди­нения фосфора.

2. Реакция на свободный п-нитрофенол: сухой остаток полученного извлечения растворяют в 5 мл этанола и прибавляют 3 мл раствора натра едкого, Через 5 мин наблюдают интенсивно желтое окрашивание. Аналогичную реакцию дает нативные метафос после нагревания смеси на водяной бане в течение 20 мин.

3.Тонкослойнохроматографическое исследование. На линию старта хроматографической пластинки наносят две капли эфирной вытяжки. Система н-гексана : хлороформа (1 : 2). Проявление: последовательно опрыскивают смесью растворов бромфенолового синего и нитрата серебра. Затем пластинку вносят в сушильный шкаф на 20 мин при 60 0С. Пластинку вынимают, охлаждают и опрыскивают раствором лимонной кислоты. При наличии метафоса в исследуемой пробе на желтом фона хроматографической пластинки появляются лиловые пятна (R =0.30-0,36).

Пятна метафоса на хроматографической пластинке можно проявлять также раствором хлорида палладия (при нагревании) и раствором аммиаката серебра в ацетоне

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ МЕТАФОСА

1) Результат реакции 2 подвергают исследованию на ФЭК с синим светофильтром. Раствор сравнения – смесь реактивов. Расчет ведут по калибровочному графику.

2) ГЖХ определение: получают гексановое извлечение, и исследуют на хромосорбе - W с 5% метилсиликоном, газ-носитель – азот.

КАРБОФОС

О-Диметил-3-[1,2-дн(карбэтоисиэтил)дитиофосфат Другие наименования: кипфос, шлатиоп, малатон, фосфотион,

Карбофос — бесцветная маслянистая жидкость с характерным неприятным запахом. Плотность 1,23 г/см3 при 25 °С. Мало растворяется в воде, но хорошо растворяется в большинстве органических растворителей, кроме предельных углеводородов. При продолжительном нагревании (около 150 °С) карбофос изомеризуется, превращаясь в тиоловый изомер:

Препарат медленно гидролизуется водой, гидролиз ускоряется в присутствии кислот и щелочей. Продуктами его гидролиза в кислой среде являются диметилтиофосфорная кислота и эфир меркаптоянтарной кислоты:

При гидролизе в щелочной среде образуется соль диметилдитиофосфорной кислоты и эфир фумаровой кислоты.

Карбофос окисляется азотной кислотой и другими окислителями. При этом образуется серная кислота, эфир тиолфосфорной кислоты и другие вещества. Если препарат длительное время находится в контакте с железом, то он разлагается и теряет инсектицидные свойства.

Технический препарат представляетсобой темно-бурую жидкостьс неприятным запахом. Он содержит примеси диметил-дитиофосфорпой кислотыксилол и другие вещества.

Карбофос выпускается в виде концентрата эмульсии, содержащего 30-60 % действующего вещества.Применяется в качестве контактного инсектицида и акарицида для борьбы с тлями, клещами на плодовых и полевых культурах и другими вредителями

В организме карбофос окисляется, при этом образуется малаоксонобладающий выраженной антихолинэстерзной активностью, и некоторые другиевещества. Предельно допустимая концентрация карбофоса в воздухе рабочей зоны 0,5 мг/мэ.

Изолирование. 1) В колбу емкостью 500 мл вносят 100 г измельченного биоматериала и 150 мл хлороформа и смесь оставляют на 4 ч, часто перемешивая ее. Затем хлороформную вытяжку сливают, а биоматериал промывают 50 мл хлороформа. Хлороформ, который применялся для промывания, присоединяют к вытяжке.

Хлороформную вытяжку при комнатной температуре выпаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 10 мл хлороформа.

2) В стакане емкостью 500 мл 100 г тщательно измельченного биоматериала размешивают с водой до получения кашицеобразной массы, рН которой доводят до 1 с помощью 10%-ной кислоты хлористоводородной. Кашицеобразную массу 5 раз настаивают с бензолом (порциями по 100 мл) по 1 ч. Бензольные вытяжки соединяют и фильтруют через бумажный фильтр, на который предварительно наносят 15 г безводного сульфата натрия.

Фильтрат переносят в колбу аппарата для перегонки жидкостей и на водяной бане (60 0С) отгоняют бензол до тех пор, пока в колбе не останется 2—4 мл жидкости. Оставшуюся жидкость выпаривают при комнатной температуре досуха. Сухой остаток растворяют в 3 мл спирта этилового, и раствор фильтруют через маленький бумажный фильтр, который затем промывают спиртом.

ОБНАРУЖЕНИЕ

1. Реакция с диазотированной сульфаниловой кислотой. Несколько мл хлороформной вытяжки из биоматериала вносят в пробирку и жидкость выпаривают досуха. К сухому остатку прибавляют 2 мл воды, 1 мл раствора диазотированной сульфаниловой кислоты и 0,5 мл 5% раствора натра едкого. Появление вишнево-красной окраски указывает на наличие карбофоса в исследуемом растворе.

2. Реакция с реактивом Марки. В фарфоровую чашку вносят несколько мл хлороформного извлечения и раствор выпаривают досуха. К сухому остатку прибавляют 5—10 капель реактива Марки. Появляется оранжевое окрашивание, которое через некоторое время переходит в темно-коричневое.

3. Реакция с сульфатом меди. Предложено два способа выполнения этой реакции для обнаружения карбофоса.

а) В пробирку вносят несколько мл хлороформного извлечения и раствор выпаривают досуха. К сухому остатку прибавляют 1 мл 10%спиртового раствора натра едкого. Пробирку нагревают на кипящей водяной бане в течение 10 мин, при этом ощущается неприятный запах продуктов разложения карбофоса. После охлаждения пробирки в нее по каплям вносят 25% раствор кислоты серной до рН = 4—5 по универсальному индикатору, затем прибавляют 1 мл хлороформа и 2 капли 10%-ного раствора меди сульфата. Хлороформный слой приобретает зеленовато-желтую краску.

б) В делительную воронку вносят 5 мл четыреххлористогоуглерода, 2—5 капель раствора исследуемого вещества и 0,2 мл 5% раствора натра едкого. Смесь интенсивно взбалтывают 1 мин. затем прибавляют 15 мл 2% раствора натрия хлорида,и жидкость снова взбалтывают 1 мин. После разделения фаз отделяют органический слой, а к водной фазе в делительной воронке прибавляют 5 мл четыреххлористого углерода, 0,3 мл 6 М кислоты хлористоводородной и взбалтывают жидкость 30 с. После разделения фаз отделяют слой органического растворителя, который в дальнейшем не исследуют.

В делительную воронку к водной фазе прибавляют 1 мл четыреххлористого углерода и 0,4 мл 1 % раствора меди сульфата, и смесь взбалтывают 1 мин. Слой органического растворителя приобретает лимонно-желтую окраску.

4. Реакция с хлоридом ртути (II). В углубление на предметном стекле вносят несколько капель извлечения, выпаривают, и сухой остаток растворяют в 1-2 этанола, прибавляют каплю раствора хлорида ртути. Углубление на стекле накрывают покровным стеклом, и предметное стекло вносят во влажную камеру на 5—10 мин. Образуются желтоватые кристаллы, имеющих форму звездочек.

5. Реакция с висмута йодидом. В углубление на предметном стекле вносят несколько капель извлечения, выпаривают, и сухой остаток растворяют в 1-2 этанола, прибавляют каплю раствора йодида висмута. Углубление на стекле накрывают покровным стеклом, и предметное стекло вносят во влажную камеру на 30—60 мин. Образуются темно-красные кристаллы в форме игл.

6.Реакция с хлористым йодом. В углубление на предметном стекле вносят несколько капель извлечения, выпаривают, и сухой остаток растворяют в 1-2 этанола и прибавляют каплю раствора хлористого йода. Образуются бурые кристаллы, которые исчезают через некоторое время,

7.Обнаружение карбофоса ТСХ. На линию старта на хроматографической пластинке наносят эфирную вытяжку, а праве на 2—3 см на линии старта — каплю раствора свидетеля. Подсушивают на воздухе, затем пластинку вносят в камеру хроматографирования, на дно которой налита смесь н-гексана: ацетона (2 : 1). Проявление: последовательно опрыскивают смесью растворов бром-фенолового синего и нитрата серебра. Затем пластинку помещают в сушильный шкаф, нагретый до 60 СС, на 20 мин. После этого пластинку охлаждают и опрыскивают раствором лимонной кислоты. При наличии карбофоса в исследуемой пробе на желтом фоне хроматографической пластинки появляются лиловые пятна (Rf = 0,60-0,65). Можно использовать и другие реактивы (растворы о-толидина,хлорида палладия, аммиаката серебра в ацетоне).

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ КАРБОФОСА

Карбофос извлекают из биоматериала бензолом. Извлеченный карбофос подвергают минерализации, образовавшиеся при этом фосфат-ионы переводят в фосфорномолибденовую синь

Минерализация карбофоса. Полученное извлечение количественно переносят в колбу Кьельдаля, при этом колбу, в которой был раствор, ополаскивают 10 мл воды и промывную жидкость также сливают в колбу Кьельдаля. В эту же колбу вносят 3 мл концентрированной серной кислоты и 10 мл концентрированной азотной кислоты. Затем смесь нагревают до просветления жидкости и появления белых паров оксидов серы. После охлаждения колбы ее содержимое переносят в мерную колбу дикостью 100 мл и объем жидкости доводят водой до метки.

Определение карбофоса. В мерную колбу емкостью 100 мл вносят 10 мл раствора минерализата. 40 мл воды, 10 мл раствора молибдата аммония и 5 мл восстанавливающей смеси. Смесь взбалтывают, через 10 мин прибавляют 20 мл раствора ацетата натрия, жидкость в колбе снова взбалтывают, затем, ее объем доводят водой до метки. С помощью фотоколориметра (светофильтр красный, кювета с толщиной поглощающего слоя 10 мм) измеряют оптическую плотность окрашенного раствора. Содержание карбофоса в пробе находят по калибровочному графику.

Метод основан на извлечении ФОВ из биологических сред экстракцией органическим растворителем (Н-гексан), отгонке растворителя на ротаци­онном испарителе с последующим определением их на газовом хроматог­рафе («Цвет-106») с термоионным детектором.Граница определения по крови для группы нитрофосов (метафос, метилнитрофос и др.) составляет 0,0002 г/л, для ТХМ-3 — 0,0005 г/л, для карбофоса — 0,001 г/л.

Клиническая картина острых отравлений ФОВ однотипна при действии различных препаратов этой группы. Отличия состоят преимущественно в степени выраженности симптомов возбуждения центральных и периферических М- и Н-холинореактивных систем, в скорости развития токсического процесса и зависят от особенностей всасывания, распределения и выделения ФОВ.

Психоневрологические нарушения Клинические симптомы острых отравлений ФОВ являются отражением двух основных фаз развития токсического процесса: токсикогенной, когда реализуется реакция соединения ХЭ с ингибитором, и соматогенной, когда идет приспособление организма к низкому уровню ХЭ.

Во всех случаях острого перорального отравления ФОВ имеют место расстройства ЦНС: нарушение психической активности больных и выраженные изменения биоэлектрической активности головного мозга, развитие раннего астенического синдрома, интоксикационного психоза или коматозного состояния. Больные с астеническим синдромом жалуются на общую слабость, головную боль, головокружение, невозможность сосредоточиться, ощущение страха, беспокойство. При ЭЭГ-исследовании у этих больных отмечаются умеренные изменения фоновой активности в виде дезорганизации основной активности мозга. Нерегулярная альфа-активность (временами заостренная в виде пиков невысокой частоты — 8— 13 кол/с, амплитудой 20—100 мкВ) сменяется нерегулярной бета-активностью (14—20 кол/с, амплитудой 5—10 мкВ) и диффузно возникающими элементами медленных волн. При интоксикационном психозе отмечаются выраженное психомоторное возбуждение, двигательное беспокойство, чувство панического страха, дезориентация во времени и окружающей обстановке. Исследование биоэлектрической активности мозга у указанных больных не представляется возможным. Коматозное состояние проявляется резким угнетением или отсутствием реакции зрачков на свет, корнсальных рефлексов, болевой чувствительности, снижением мышечного тонуса и сухожильных рефлексов. Часто наблюдается поверхностная кома с гипертонусом мышц, повыше­нием сухожильных рефлексов. Возможны генерализованные судороги эпилептиформного вида.

При ЭЭГ-исследовании больных в коматозном состоянии имеет место высокочастотная бета-активность (20— 40 кол/с, амплитудой 5—30 мкВ), переходящая в верете­нообразные колебания (19—20 кол/с, амплитудой 20—40 мкВ) и отдельные элементы активности (10—13 кол/с, ам­плитудой 20—60 мкВ).

Миоз является одним из наиболее характерных при­знаков интоксикации ФОВ и отмечается почти у всех боль­ных с выраженной клинической картиной отравления. Со­кращение мышцы радужной оболочки сопровождается нарушениями зрения в виде сетки перед глазами, ощущения двоения в глазах. Миоз может служить критерием тяжести состояния больных. При тяжелых отравлениях зрачки то­чечной величины сохраняются в течение длительного вре­мени, реакция их на свет отсутствует, отмечается верти­кальный и горизонтальный нистагм. Выраженный миоз иног­да наблюдается в течение нескольких часов после смерти больного.

Поражения периферичес­кой нервной системы характеризуется мышечной слабостью, снижением мышечного тонуса, болезненностью при пальпации мышц конечностей. Одним из объективных симптомов поражения периферической нервной системы яв­ляются миофибрилляции — фибриллярные мышечные подергивания (гиперкинезы миоклонического типа). Наиболее характерными являются миофибрилляции языка, голеней. Фибриллярные подергивания мышц языка наблюдаются во всех случаях перорального отравления ФОВ и, возможно, связаны с его местным действием. В некоторых случаях миофибрилляции распространяются на мимическую муску­латуру лица, область больших грудных мышц, верхние и нижние конечности. Распространенность и частота миофибрилляции соответствуют тяжести клинического течения отравления. При тяжелых интоксикациях наблюдаются гиперкинезы хореического типа — устойчивые волнообразные движения мышц.

При электромиографическом (ЭМГ) исследовании икро­ножных мышц у больных отмечается резкое снижение биоэлектрической активности при произвольном мышечном со­кращении до 80—100 кол/с, амплитудой 30—120 мкВ. Миофибрилляции регистрируются в виде спонтанной биоэлек­трической активности мышц амплитудой 25—40 мкВ. При тяжелых отравлениях вследствие блокады нервно-мышечной передачи у больных отмечается паралич двигательной мускулатуры, характеризующийся отсутствием биоэлектриче­ской активности мышц, миофибрилляцией и спонтанной мышечной активностью.

В соматогенной фазе интоксикации наблюдаются общая астения, снижение психической активности. У лиц, стра­дающих хроническим алкоголизмом, возможно развитие ос­трого галлюциноза. Впоследствии длительно сохраняются эмоциональная лабильность, резкое снижение качества про­фессиональных навыков, особенно в точных действиях (ма­шинистки). Нормализация происходит медленно — до 1 года сохраняются изменения основной активности мозга.

Вследствие повышения бронхореи (исте­чения (экссудации) секрета бронхиальных желез) у больных с острым отравлением ФОВ в 80—85% случаев отмечается нарушение дыхания (аспирационно-обтурационными расстройствами). Иногда выделяется до 1,5 л секрета и более, в котором содержится до 8—10% белка, способствующего его вспени­ванию. Пленки закупоривают дыхательные пути. Пена вы­деляется изо рта, носа, отмечается цианоз, что напоминает картину острого отека легких и может явиться источником ошибочной диагностики и лечения данного состояния. Гемодинамический отек легких в остром периоде отравления ФОВ, как правило, не развивается в связи с отсутствием явлений острой левожелудочковой недостаточности.

Центральная форма нарушения дыхания обусловлена преимущественно нарушением функции дыхательных мышц, которое протекает в две фазы: первая (начальная) фаза сопровождается гипертонусом дыхательных мышц, ригидностью грудной клетки за счет судорожного спазма поперечнополосатой мускулатуры; вторая фаза характеризуется паралитическим состоянием мышц, при этом грудная клетка не участвует в акте дыхания или развивается парадоксальный тип дыхания.

Нарушения функций сердечно-сосудистой системы. Нарушения со стороны сердечно-сосудистой системы про­являются ранним гипертоническим синдромом, нарушением ритма и проводимости сердца, экзотоксическим шоком. Для раннего гипертонического синдрома характерно увеличение систолического давления до 200—250 мм рт. ст. и диастолического до 150—160 мм рт. ст. вследствие выраженной гиперадреналинемии. При ЭКГ-исследовании наряду с при­знаками диффузного изменения миокарда по типу миокар-диодистрофии отмечается резкая брадикардия до 40—20 в 1 мин, увеличение электрической систолы, замедление внутрижелудочковой проводимости, атриовентрикулярная бло­када, фибрилляция желудочков. При развитии экзотоксического шока обращают на себя внимание резкая бледность кожных покровов, цианоз слизистых оболочек, падение артериального давления, выраженная одышка и расстройство сознания.

При исследовании центральной гемодинамики обнаруживается резкое снижение ударного и минутного объема крови, массы циркулирующей крови. Падает центральное венозное давление и общее периферическое сосудистое со­противление. Эти явления связаны с развитием неврогенной вазоплегии и относительной гиповолемии в результате пе­рераспределения крови в венозную систему низкого давле­ния. При исследовании коагулограммы определяется повы­шение толерантности плазмы к гепарину, снижение времени рекальцификации, снижение фибринолитической активно­сти, что указывает на изменение коагулирующих свойств крови в сторону гиперкоагуляции. Однако при декомпенсированной фазе шока с резким падением артериального давления развиваются явления гипокоагуляции и фибринолиза. У больных с явлениями шока при отравлении ФОБ летальность около 60%.

Нарушения функций желудочно-кишечного тракта, печени и почек. Со стороны желудочно-кишечного тракта вследствие выраженного спазма гладкой мускулатуры желудка и кишечника у больных отмечаются тошнота, рвота, схваткообразные боли в животе, диарея. Кишечная колика может развиться даже при легких отравлениях, когда прочие симптомы интоксикации выражены слабо. В этих случаях возможны диагностические ошибки (ошибочная диагностика у больного острого хирургического заболевания — аппендицита, холецистита), что влечет за собой проведение неоправданных хирургических вмешательств.

У больных с отравлением ФОБ клинические признаки поражения печени, как правило, отсутствуют. При яв­лениях шока отмечаются неспецифические изменения пе­чени, свойственные данному состоянию. Характерным при отравлении ФОВ является значительно выраженное нару­шение выделительной функции печени, выявляемое при радиоизотопной гепатографии, и снижение показателя сосудистого тонуса по данным импедансной реоплетизмо-графии, которые указывают на наличие холестаза и вы­раженной сосудистой дистонии. У больных, страдающих хроническим алкоголизмом, возможно развитие токсиче­ской дистрофии печени, проявляющейся характерными клиническими симптомами, повышением активности спе­цифических ферментов, билирубина.

Поражение почек не является характерным для данной интоксикации и проявляется развитием синдрома «шоковой» почки у больных с тяжелым отравлением, осложненным длительным коллапсом.

При беременности у женщин возможно наступление аборта или преждевременных родов.

Указанная выше картина отравления остается однотипной при различных путях поступления токсичного вещества в организм, однако сроки наступления, выраженность, продолжительность и постоянство симптомов варьируют. При ингаляционном отравлении и попадании ФОВ в глаза характерен длительный миоз. Для перкутанного отравления характерны мышечные фибрилляции в месте контакта с ядом. При пероральном отравлении рано возникают тош­нота, рвота, острая боль в животе, диарея и другие диспепсические расстройства.

Утверждаю

Заместитель Главного

государственного

санитарного врача СССР

А.И.ЗАИЧЕНКО

28 января 1980 г. N 2133-80


7704398951252787.html
7704474573295600.html
    PR.RU™